La soya es un cultivo cuya producción nacional en el Ecuador no es suficiente para suplir la demanda interna. Por esta razón, se recurre a la importación de semilla de soya para siembra y soya en grano para consumo, desde países donde el uso de soya transgénica ha sido aprobado. Como consecuencia, existe la probabilidad del ingreso de este cultivo a territorio ecuatoriano. En esta investigación, se estandarizó una metodología para la detección y cuantificación de soya genéticamente modificada con tecnología SYBR Green. Los primers utilizados para la amplificación corresponden a secuencias específicas de los dos elementos recombinantes más representativos en soya genéticamente modificada, el promotor 35S del Virus del Mosaico de la Coliflor (P35S) y el terminador NOS del plásmido Ti de Agrobacterium tumefaciens (TNOS), generando amplicones de 200pb y de 69pb respectivamente. El análisis cuantitativo se realizó a partir de la generación de una curva estándar en base a la amplificación usando los primers mencionados en material de referencia certificado con concentraciones de 0.01 %, 0.1 %, 1 % y 10 % de soya transgénica del evento GTS 40-3-2. El límite de detección se estableció en 0.01 %, mientras que el límite de cuantificación fue establecido en 0.1 %. En 2 de las 26 muestras de soya analizadas se encontró más del 0.1 % de OGM (organismo genéticamente modificado) (muestra 22 con 0.2 % y la muestra 23 con 14 %). Además se detectó presencia adventicia de soya transgénica en 8 de las muestras estudiadas. Debido a las regulaciones de OGMs que existen en el Ecuador, este tipo de análisis es importante para confirmar la presencia de OGMs en el territorio ecuatoriano y evidencia la necesidad de contar con personal capacitado e instituciones especializadas en la detección y análisis de organismos genéticamente modificados.

Soybean is a crop with a national production in Ecuador which is insufficient to meet its demand. Therefore, soybean seeds and soya beans are imported from countries where the use of transgenic soybean has been approved. As a consequence, there is a probability of finding this type of soybean in Ecuadorian territory. In this research, a detection and quantification SYBR Green-based method of genetically modified soybean was standardized. Primers used for the amplification corresponded to specific sequences of the two most representative recombinant elements in GM (genetically modified) crops, the 35S promoter from the Cauliflower Mosaic Virus (P35S) and NOS terminator from Ti plasmid in Agrobacterium tumefaciens (TNOS). These elements generated 200bp and 69bp amplicons respectively. The quantitative analysis was performed generating a standard curve based on the amplification of certified reference materials with 0.01 %, 0.1 %, 1 % y 10 % of GM soybean event GTS 40-3-2, using the above mentioned primers. The detection limit was set at 0.01 % while the quantification limit was set at 0.1 %. In 2 of the 26 soybean samples analyzed, more than 0.1 % of GMOs was found (sample 22 with 0.2 % and sample 23 with 14 %). Additionally, adventitious GMO presence was detected in 8 of the tested samples. Due to Ecuadorian GMO regulations, this kind of analysis is important in order to determine the presence of GMOs in Ecuador, and is clear evidence for the need of trained personnel and specialized institutions for the detection and analysis of GMOs.

El desarrollo y cultivo de organismos modificados genéticamente sigue aumentando a nivel mundial. Las importaciones de alimentos y forrajes desde fuera de la Unión Europea (UE) requerirán posteriormente un mayor esfuerzo por parte de las autoridades responsables para controlar el cumplimiento de las normas de etiquetado efectivas. El objetivo de este estudio fue el desarrollo de GMOfinder, una base de datos para la recopilación e interpretación de información relacionada con la detección de organismos genéticamente modificados (OGM). Diferentes elementos genéticos (por ejemplo, promotores, terminadores, genes estructurales) se introducen artificialmente en las plantas para establecer nuevas modificaciones genéticas. Los elementos introducidos pueden variar entre los eventos de OGM, dependiendo de los rasgos previstos. La detección de dichos elementos insertados con la reacción en cadena de la polimerasa (en tiempo real) es un primer paso común para analizar las muestras en busca de cualquier modificación genética. A partir del patrón de elementos detectables y no detectables, con el GMOfinder se pueden extraer conclusiones valiosas sobre la identidad de los supuestos eventos de OGM presentes. La información sobre elementos genéticos seleccionados de la literatura, las solicitudes de autorización y otras fuentes (web) se integraron sistemáticamente en un formato de matriz tabular. Se tuvo especial cuidado en registrar adicionalmente las fuentes de la información, lo que facilitó la evaluación de los resultados del tamizaje y el rastreo de posibles errores en la matriz. El GMOfinder accede a los datos de la matriz de elementos con algoritmos implementados y facilita la interpretación del resultado de las evaluaciones. Tal preselección ayuda a reducir sistemáticamente los candidatos para reacciones de identificación posteriores. La visualización opcional de eventos con elementos potencialmente enmascarados completa las características incluidas.

The development and cultivation of genetically modified crops is still increasing globally. Food and feed imports from outside the European Union (EU) will subsequently require more effort from the responsible authorities in monitoring the compliance with effective labelling regulations. The aim of this study was the development of the GMOfinder, a database for collection and interpretation of information related to the screening for genetically modified organisms (GMOs). Different genetic elements (e.g. promoters, terminators, structural genes) are artificially introduced into plants to establish new genetic modifications. The introduced elements may vary between GMO events, depending on the intended trait(s). Screening for such inserted elements with (real-time) polymerase chain reaction is a common first step to analyse samples for the presence of any genetical modification. From the pattern of detectable and nondetectable elements, valuable conclusions about the identity of putative present GMO event(s) can be drawn with the GMOfinder. Information about selected genetic elements from the literature, applications for authorisation and other (web) sources were systematically integrated in a tabular matrix format. Special care was taken to additionally record the sources of the information, thus facilitating evaluation of screening results, and tracing of possible errors in the matrix. The GMOfinder accesses data from the element matrix with implemented algorithms and facilitates to interpret the outcome of screenings. Such a preselection helps to systematically narrow down the candidates for subsequent identification reactions. Optional display of events with potentially masked elements completes the included features.

El número de instrumentos de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) disponibles ha aumentado considerablemente en los últimos años. Sin embargo, hay poca información disponible sobre el rendimiento de los métodos cuantitativos validados cuando se prueban en diferentes instrumentos. Se ha diseñado un estudio para evaluar la solidez de tres métodos validados para la cuantificación de organismos genéticamente modificados (OGM) en seis plataformas en tiempo real de cuatro proveedores diferentes. Se evaluó el rendimiento de tres métodos validados para la detección específica de eventos de maíz Bt11, maíz DAS 59122 y soja MON 89788 en seis plataformas de qPCR (ABI 7900 HT, ABI Prism® 7700 y ABI 7500 de Applied Biosystems; LightCycler® 480 de Roche; Mx3005P® de Stratagene e iQ™5 de Bio-Rad). Los criterios de rendimiento del método se compararon con los requisitos de rendimiento del método de la Red Europea de Laboratorios de OMG para métodos analíticos de ensayo de OMG. La última comparación indica que los criterios se cumplen para la mayoría de las plataformas y niveles de concentración de OGM, aunque con excepciones menores. El análisis de varianza (unidireccional) indicó que la cuantificación de los OGM se vio afectada por las plataformas, que no respondieron de manera uniforme en todos los niveles de OGM. Un análisis de varianza bidireccional confirmó que había interacciones significativas entre las plataformas y los niveles de GM. La comparación por pares del rendimiento de las plataformas indicó que algunas se desvían significativamente de otras, aunque se observaron diferencias entre los métodos.

The number of real-time polymerase chain reaction (qPCR) instruments available has greatly increased over recent years. However, little information is available on the performance of validated quantitative methods when tested in different instruments. A study has been designed to evaluate the robustness of three validated methods for genetically modified organisms (GMO) quantification across six real-time platforms from four different suppliers. The performance of three validated methods for event-specific detection of Bt11 maize, DAS 59122 maize and MON 89788 soybean was evaluated on six qPCR platforms (ABI 7900 HT, ABI Prism® 7700 and ABI 7500 from Applied Biosystems; LightCycler® 480 from Roche; Mx3005P® from Stratagene; and iQ™5 from Bio-Rad). Method performance criteria were compared against European Network of GMO Laboratories method performance requirements for analytical methods of GMO testing. The latter comparison indicates that the criteria are fulfilled for most of the platforms and levels of GMO concentrations, though with minor exceptions. The analysis of variance (one-way) indicated that the quantification of GMOs was affected by the platforms, which did not respond consistently across GM levels. A two-way analysis of variance confirmed that there were significant interactions between platforms and GM levels. The pairwise comparison of the platforms' performance indicated that some deviate significantly from others, though differences between methods were observed.

Se desarrolló un plásmido estándar que contiene ocho objetivos para la detección cuantitativa de soja y algodón genéticamente modificados (GM). Estos ocho objetivos se unieron en tándem para formar el plásmido pTLE8 con una longitud de 3680 pb. Este plásmido contiene parte del gen endógeno Lec1 de soja, el promotor 35S del virus del mosaico de la coliflor (CaMV), el terminador de nopalina sintasa (NOS) de Agrobacterium tumefaciens, el gen PAT de la línea de soja A2704-12, la unión 5′ específica de evento región de Roundup-Ready Soya (RRS, 35SG), el gen Cry1A(c) de Bacillus thuringiensis (Bt), el gen Sad1 del algodón endógeno y una parte del gen RRS EPSPS. Las eficiencias de la PCR con pTLE8 como calibrador oscilaron entre el 99,4 % y el 100,2 % para las curvas estándar del gen RRS EPSPS y el gen Lec1 específico del taxón (R 2 ≥ 0,996). Los límites de detección y cuantificación fueron nueve y 15 copias, respectivamente. Los valores de desviación estándar (SD) y desviación estándar relativa (RSD) de repetibilidad fueron de 0,09 a 0,52 y de 0,28% a 2,11%, y los de reproducibilidad fueron de 0,12 a 1,15 y de 0,42% a 3,85%, respectivamente. El factor de conversión promedio (Cf) para la cuantificación de los CRMs RRS fue de 0,91. La RSD de los valores medios para muestras conocidas osciló entre 3,09 % y 18,53 %, y los sesgos fueron entre 0,5 % y 40 %. Estos resultados muestran que nuestro método que usa el plásmido pTLE8 como material de referencia (RM) es confiable y factible en la identificación de soja GM, allanando así el camino para el establecimiento de sistemas de gestión de identificación para varios productos que contienen componentes OGM

A standard plasmid containing eight targets was developed for quantitative detection of genetically modified (GM) soybeans and cotton. These eight targets were joined in tandem to form the pTLE8 plasmid with a length of 3,680 bp. This plasmid contains part of the endogenous soybean Lec1 gene, the Cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter, the Agrobacterium tumefaciens nopaline synthase (NOS) terminator, the PAT gene of the soybean line A2704-12, the event-specific 5′-junction region of Roundup-Ready Soya (RRS, 35SG), the Cry1A(c) gene from Bacillus thuringiensis (Bt), the endogenous cotton Sad1 gene, and a part of RRS EPSPS gene. The PCR efficiencies with pTLE8 as a calibrator ranged from 99.4% to 100.2% for the standard curves of the RRS EPSPS gene and the taxon-specific Lec1 gene (R 2 ≥ 0.996). The limits of detection and quantification were nine and 15 copies, respectively. The standard deviation (SD) and relative standard deviation (RSD) values of repeatability were from 0.09 to 0.52 and from 0.28% to 2.11%, and those for reproducibility were from 0.12 to 1.15 and 0.42% to 3.85%, respectively. The average conversion factor (Cf) for the CRMs RRS quantification was 0.91. The RSD of the mean values for known samples ranged from 3.09% to 18.53%, and the biases were from 0.5% to 40%. These results show that our method using the pTLE8 plasmid as a reference material (RM) is reliable and feasible in the identification of GM soybeans, thus paving the way for the establishment of identification management systems for various products containing GMO components.

La identificación de cultivos presentes en las matrices de alimentos y/o forrajes representa un paso importante en las estrategias de detección dirigidas a los organismos genéticamente modificados (OGM). La soja, el maíz, la colza, el arroz, el algodón, la remolacha azucarera y la patata son hasta la fecha las fuentes más importantes de materiales modificados genéticamente importados en la Unión Europea (UE). Para permitir la detección de su presencia en un enfoque de detección integrado, se ha desarrollado un conjunto de métodos de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) SYBR®Green que se pueden usar en las mismas condiciones de ensayo y con una eficiencia similar para cada uno de los cultivos antes mencionados. Se muestra que cada método de qPCR cumple con los criterios de rendimiento (es decir, especificidad, límite de detección y eficiencia de la PCR) establecidos por la Red Europea de Laboratorios de OGM (ENGL). Cuando se combinan con los métodos de qPCR equivalentes dirigidos a elementos de OGM, estos métodos de qPCR SYBR®Green específicos de cultivo pueden ayudar al desarrollo de una herramienta eficiente para determinar la presencia de OGM en alimentos y/o productos para forrajes.

Identification of crops present in food and/or feed matrices represents an important step in the screening strategies targeting genetically modified organisms (GMO). Soybean, maize, oilseed rape, rice, cotton, sugar beet and potato are to date the most important sources of genetically modified materials imported in the European Union (EU). In order to allow detection of their presence in an integrated screening approach, a set of SYBR®Green real-time polymerase chain reaction (qPCR) methods has been developed which can be used under the same assay conditions and at similar efficiency for each of the abovementioned crops. Each qPCR method is shown to meet the performance criteria (i.e. specificity, limit of detection and PCR efficiency) set by the European Network of GMO Laboratories (ENGL). When combined with the equivalent qPCR methods targeting GMO elements, these crop-specific SYBR®Green qPCR methods can aid the development of an efficient tool for determining GMO presence in food and/or feed products.

Los organismos modificados genéticamente (OMG) se han desarrollado principalmente para la producción en masa de plantas agrícolas; sin embargo, existe la preocupación de que los cultivos transgénicos puedan causar efectos secundarios en los ecosistemas y los seres humanos. Por lo tanto, para rastrear cuantitativamente los productos modificados genéticamente, construimos una matriz de inmunosensores quimioluminométricos para la detección de proteínas marcadoras recombinantes expresadas en OMG, es decir, 5-enolpiruvilshikimato-3-fosfato sintasa (EPSPS), neomicina fosfotransferasa II (NPT II) y fofinotricina acetiltransferasa (PAT). Se generaron anticuerpos monoclonales y policlonales específicos para cada marcador, y se caracterizaron las especificidades e inmunorreactividades para los respectivos marcadores. Los anticuerpos de captura se inmovilizaron en regiones predeterminadas de un portaobjetos de vidrio donde se realizaron los inmunoensayos tipo sándwich. Los fotodiodos se ubicaron en la parte inferior del portaobjetos en una disposición alineada con los sitios de anticuerpos inmovilizados de manera que las señales de luz resultantes de los inmunoensayos pudieran detectarse in situ. En condiciones óptimas, los inmunosensores fueron capaces de detectar un 1% de OMG marcados con EPSPS, que era el contenido mínimo sobre el contenido total, y un 3% de OMG marcados con NPT II o PAT. La matriz de sensores desarrollada en este estudio sería útil para medir un OGM en particular en una muestra que contenga especies no identificadas.

Genetically modified organisms (GMOs) have been mainly developed for mass production of agricultural plants; however, there are concerns that transgenic crops might cause side effects on ecosystems and human beings. Therefore, to quantitatively trace the genetically modified products, we constructed a chemiluminometric immunosensor array for the detection of recombinant marker proteins expressed in GMOs, i.e., 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS), neomycin phosphotransferase II (NPT II), and phophinothricin acethyltransferase (PAT). Monoclonal and polyclonal antibodies specific to each marker were raised, and the specificities and immunoreactivities to the respective markers were characterized. The capture antibodies were immobilized on predetermined regions of a glass slide where the sandwich-type immunoassays were carried out. Photodiodes were located on the bottom of the slide in an aligned arrangement to the immobilized antibody sites such that the light signals resulting from the immunoassays could be detected in situ. Under optimal conditions, the immunosensors were able to detect 1% GMO marked with EPSPS, which was the minimum content over the total content, and 3% GMOs labeled with NPT II or PAT. The sensor array developed in this study would be useful for measuring a particular GMO in a specimen containing unidentified species.

Se han desarrollado varias técnicas para la detección y cuantificación de organismos genéticamente modificados, pero la PCR cuantitativa en tiempo real es, con mucho, el enfoque más popular. Entre las químicas de PCR en tiempo real más utilizadas se encuentran las sondas TaqMan y SYBR green, pero también se han desarrollado muchas otras químicas de detección. Debido a que su rendimiento nunca se ha comparado sistemáticamente, aquí presentamos una evaluación exhaustiva de algunas químicas prometedoras: colorantes de marcado de ADN no específicos de secuencia (verde SYBR), tecnologías basadas en cebadores (cebadores AmpliFluor, Plexor, Lux) y técnicas que involucran cebadores doblemente marcados. sondas, que comprenden sondas de hibridación (baliza molecular) e hidrólisis (TaqMan, CPT, LNA y MGB), basadas en datos experimentales publicados recientemente. Para cada una de las químicas de detección se incluyeron ensayos dirigidos a loci seleccionados. Las químicas de PCR en tiempo real se compararon posteriormente en cuanto a su eficiencia en la amplificación de PCR y los límites de detección y cuantificación. Se evaluó la aplicabilidad general de los productos químicos, agregando aspectos prácticos y de costo a las características de desempeño. Ninguna de las químicas parecía ser significativamente mejor que otra, pero ciertas características favorecen la tecnología LNA y MGB como buenas alternativas a TaqMan en los ensayos de cuantificación. Los ensayos SYBR green y molecular beacon pueden funcionar igual de bien, pero es posible que necesiten más optimización antes de su uso.

Several techniques have been developed for detection and quantification of genetically modified organisms, but quantitative real-time PCR is by far the most popular approach. Among the most commonly used real-time PCR chemistries are TaqMan probes and SYBR green, but many other detection chemistries have also been developed. Because their performance has never been compared systematically, here we present an extensive evaluation of some promising chemistries: sequence-unspecific DNA labeling dyes (SYBR green), primer-based technologies (AmpliFluor, Plexor, Lux primers), and techniques involving double-labeled probes, comprising hybridization (molecular beacon) and hydrolysis (TaqMan, CPT, LNA, and MGB) probes, based on recently published experimental data. For each of the detection chemistries assays were included targeting selected loci. Real-time PCR chemistries were subsequently compared for their efficiency in PCR amplification and limits of detection and quantification. The overall applicability of the chemistries was evaluated, adding practicability and cost issues to the performance characteristics. None of the chemistries seemed to be significantly better than any other, but certain features favor LNA and MGB technology as good alternatives to TaqMan in quantification assays. SYBR green and molecular beacon assays can perform equally well but may need more optimization prior to use.

Se ha desarrollado un método cuantitativo rápido en el sitio o cerca del mismo para usar como una decisión predictiva previa a la cosecha o como una herramienta de monitoreo de la coexistencia para detectar la presencia accidental de organismos modificados genéticamente (GM). Basado en un protocolo basado en laboratorio para la cuantificación en tiempo real (RT) del evento MON810 GM en granos de maíz, el método de reacción en cadena de la polimerasa dúplex RT se construyó alrededor de la plataforma portátil Cepheid SmartCyclerII, que requiere solo una infraestructura de soporte modesta para la aplicación de campo. La validación a través de un ensayo interlaboratorio internacional mostró un buen cumplimiento de los requisitos mínimos de rendimiento del ensayo definidos por la Red Europea de Laboratorios de OMG (RSDr = 18,5 %; RSDR = 32,8; Bias = 26,7 %).

A rapid on-, or near-site, quantitative method for use as a pre-harvest predictive decision, or co-existence monitoring, tool for adventitious genetically modified (GM) presence has been developed. Based on a laboratory-based protocol for real-time (RT) quantification of the MON810 GM event in maize kernels, the duplex RT polymerase chain reaction method was constructed around the portable Cepheid SmartCyclerII platform, requiring only modest support infrastructure for field application. Validation through an international ring trial showed good compliance with minimum assay performance requirements as defined by the European Network of GMO Laboratories (RSDr = 18.5%; RSDR = 32.8; Bias = 26.7%).

El enfoque modular para el análisis de organismos genéticamente modificados (OGM) se basa en la independencia de los módulos combinados (es decir, extracción de ADN y cuantificación de GM). La validez de esta suposición debe probarse sobre la base de criterios de desempeño específicos. Se llevó a cabo un experimento utilizando, como referencia, el módulo de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) cuantitativo en tiempo real validado para la detección de soja transgénica (RRS) Roundup Ready® tolerante al glifosato. Se utilizaron diferentes módulos de extracción de ADN (CTAB, Wizard y Dellaporta) para extraer ADN de diferentes matrices de alimentos/forrajes (forrajes, galletas y material de referencia certificado [CRM 1%]) que contenían el objetivo del módulo de PCR en tiempo real utilizado para la validación. La pureza y la integridad estructural (ausencia de inhibición) se utilizaron como criterios básicos que debe cumplir un módulo de extracción de ADN para proporcionar un molde de ADN adecuado para el análisis cuantitativo de OMG basado en PCR en tiempo real (RT). Cuando se aplicaron criterios de rendimiento (eliminación de extractos de ADN no conformes), se demostró estadísticamente la independencia de la cuantificación de OGM del método de extracción y la matriz, excepto en el caso de Wizard aplicado a la galleta. Un procedimiento basado en lógica difusa también confirmó el rendimiento relativamente bajo de la combinación Asistente/galleta. Para RRS, este estudio reconoce que la modularidad puede ser generalmente aceptada, con la limitación de evitar combinar material altamente procesado (es decir, galletas) con un sistema de perlas magnéticas (es decir, Wizard).

The modular approach to analysis of genetically modified organisms (GMOs) relies on the independence of the modules combined (i.e. DNA extraction and GM quantification). The validity of this assumption has to be proved on the basis of specific performance criteria. An experiment was conducted using, as a reference, the validated quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) module for detection of glyphosate-tolerant Roundup Ready® GM soybean (RRS). Different DNA extraction modules (CTAB, Wizard and Dellaporta), were used to extract DNA from different food/feed matrices (feed, biscuit and certified reference material [CRM 1%]) containing the target of the real-time PCR module used for validation. Purity and structural integrity (absence of inhibition) were used as basic criteria that a DNA extraction module must satisfy in order to provide suitable template DNA for quantitative real-time (RT) PCR-based GMO analysis. When performance criteria were applied (removal of non-compliant DNA extracts), the independence of GMO quantification from the extraction method and matrix was statistically proved, except in the case of Wizard applied to biscuit. A fuzzy logic-based procedure also confirmed the relatively poor performance of the Wizard/biscuit combination. For RRS, this study recognises that modularity can be generally accepted, with the limitation of avoiding combining highly processed material (i.e. biscuit) with a magnetic-beads system (i.e. Wizard).

La detección y la identificación de organismos genéticamente modificados (OGM) en semillas, granos y otros materiales están impulsadas por requisitos legales y demandas comerciales. En los Reglamentos de alimentos y piensos de la UE [Reg. (CE) n.º 1829/2003, reg. (CE) n.° 1830/2003] exigen el etiquetado obligatorio de todos los productos derivados de OMG, incluidos los productos a granel, las semillas tanto para el consumo humano como para la alimentación animal. El Reglamento sobre alimentos y piensos establece en el 0,9 % el umbral para la presencia accidental de materiales derivados de OGM autorizados y en el 0 % para los OMG no autorizados. Para probar la cantidad de OGM de manera consistente y reproducible, se requieren métodos analíticos adecuados. Además, también se requiere un etiquetado obligatorio para aquellos productos en los que el ADN o las proteínas derivadas de OGM ya no son detectables, como en el caso de los aceites altamente refinados. Además, debe garantizarse la trazabilidad de los OGM en todos los productos elaborados a partir de OMG en todas las etapas de su comercialización a lo largo de la cadena de producción y distribución, tal como exige el Reg. (CE) n.º 1830/2003. En el proceso de autorización de OGM, los solicitantes deben proporcionar a las autoridades competentes un método específico para la detección e identificación del evento de transformación. En tal sentido, el Laboratorio Comunitario de Referencia para Alimentos y Piensos GM (CRL-GMFF) (establecido por Reg. (EC) No 1830/2003), tiene el mandato de validar los métodos proporcionados por los productores de OGM (http://gmo -crl.jrc.it/). Todos los métodos validados por CRL-GMFF están publicados en el Registro de GM (http://ec.europa.eu/food/food/biotechnology/authorisation/index_en.htm). Otros métodos para la detección de OGM están anexados a estándares internacionales (ISO 21569:2005, ISO 21570:2005, ISO 21572:2005). En este sentido, y como medida para implementar la legislación y facilitar a las partes interesadas la recuperación rápida de métodos, se ha establecido y mantenido una base de datos integral de métodos en la Unidad de Biotecnología y OGM del Instituto de Salud y Protección del Consumidor (IHCP) de la Comisión Europea, cuyo objetivo es en la difusión de información sobre métodos validados para la detección y cuantificación de OGM

The detection and the identification of genetically modified organisms (GMOs) in seeds, grains and other materials are driven by legal requirements and marketing demands. In the EU food and feed Regulations [Reg. (EC) No 1829/2003, Reg. (EC) No 1830/2003] require compulsory labeling for all GMO-derived products including bulk commodities, seeds both for human consumption and animal feeding. The food and feed Regulation sets to 0.9% the threshold for the adventitious presence of authorized GMO-derived materials and 0% for non-authorized GMOs. In order to test the amount of GMOs in a consistent and reproducible way suitable analytical methods are required. Moreover, mandatory labeling is also required for those products where GMO-derived DNA or proteins are no longer detectable as for highly refined oils. In addition, traceability of GMOs has to be guaranteed in all products produced from GMOs at all stages of their placing on the market through the production and distribution chain as required by Reg. (EC) No 1830/2003.In the process of GMO authorization an event-specific method for detection and identification of the transformation event must be provided by the applicants to the competent Authorities. In such respect, the Community Reference Laboratory for GM Food and Feed (CRL-GMFF) (established by Reg. (EC) No 1830/2003), has the mandate to validate the methods provided by the GMOs producers (http://gmo-crl.jrc.it/). All the CRL-GMFF validated methods are published in the GM Register (http://ec.europa.eu/food/food/biotechnology/authorisation/index_en.htm).Other methods for detection of GMOs are annexed to international standards (ISO 21569:2005, ISO 21570:2005, ISO 21572:2005). In this respect, and as a measure to implement legislation and facilitate stakeholders in quick retrieval of methods, a comprehensive database of methods has been established and maintained at Biotechnology and GMOs Unit of the European Commissions Institute for Health and Consumer Protection (IHCP), aimed at the diffusion of information on validated methods for detection and quantification of GMOs